Mikroenjeksiyon sürecinde, toplanan yumurtalar kültür solüsyonları içersinde matürasyonlarını tamamlamak amacıyla 2- 3 saat 37 derece sıcaklık ve %6 CO2 içeren inkübatörlerde inkübe edilir. Bu süre içerisinde semen örneği hazırlanır. 2- 3 saat sonra yumurtaların çevresindeki hücreler temizlenerek olgunlukları kontrol edilir. Sadece olgun yumurtalara işlem yapılmalıdır. Yumurtalar temizlendikten sonra mikroenjeksiyon işlemi yapılır.
Embriyo Kalitesi
Embriyoların kalitesi döllenme sonrası bazı şekilsel (morfolojik) parametrelere göre değerlendirilir. Embriyoların morfolojileri mikroskopta ve aşağıdaki kriterlere göre değerlendirilir.
- Embriyo hücre (blastomer) sayısı
- Embriyo blastomer büyüklüğü (blastomerlerin eşit ya da eşit olmaması)
- Fragmantasyon (canlı olmayan hücre artıkları) varlığı ve yüzdesi Bütün bu kriterler ışığında embriyolar kalitelerine (grade) göre şu şekilde sınıflandırılır:
- Grade I embriyo: Bu embriyolar eşit büyüklükte, düzenli blastomerlere sahiptir ve fragman içermezler.
- Grade II embriyo: Eşit büyüklükte blastomerler içermekle birlikte az miktarda
(< %20 ) fragman içerirler.
- Grade III embriyo: Blastomerleri eşit olmayıp fragmanları fazladır.
(%20-%50)
- Grade IV embriyo: Blastomerleri eşit değildir ve fragmanları % 50' den fazladır. Yapılan araştırmalar Grade I ve Grade II embriyoların transferi ile bu embriyoların gelişim potansiyellerinin daha yüksek olmasına bağlı olarak gebelik oluşma şansının Grade III ve Grade IV embriyoların transferine göre daha yüksek olduğunu göstermiştir.